多形性胶质母细胞瘤是成人中最具破坏性和广泛传播的原发性中枢神经系统肿瘤，存活率低，死亡率高。现有的治疗方法不能为患者带来实质性益处;因此，需要新的治疗策略。活性化合物是一种从中药贝母中提取的天然生物活性化合物，具有多种药理作用，尤其是抗癌活性。然而，其对多形性胶质母细胞瘤的抗癌作用及其潜在机制尚未得到证实。这项研究旨在探讨在人多形性胶质母细胞瘤细胞贝母乙素的潜在抗肿瘤作用，并探讨相关的分子信号传导机制在体外和体内的。用和集落形成测定法检测细胞活力和增殖。通过透射电子显微镜评估与自噬相关的形态学变化。通过流式细胞术测量细胞周期速率。为了检测体外和体内相关基因和信号传导途径的变化，使用印迹和免疫组织化学分析。活性化合物显着抑制多形性胶质母细胞瘤细胞的增殖和集落形成，并导致许多肿瘤相关基因和转录产物的变化。活性化合物的潜在抗多形性胶质母细胞瘤作用可能涉及细胞周期停滞和自噬通量阻断，通过细胞周期蛋白网络的表达变化。还观察到流式细胞术结果和透射电子显微镜发现的变化。分子改变包括不仅下调磷酸蛋白激酶和磷酸原合酶激酶的表达，还包括磷酸激活的蛋白激酶和磷酸的表达。此外，蛋白激酶的过表达和蛋白激酶的抑制分别逆转和增加了在多形性胶质母细胞瘤细胞中的活性化合物诱导的细胞周期停滞。激活的蛋白激酶的细胞活化逆转了自噬通量蛋白标记物水平的变化。这些结果表明，活性化合物通过抑制蛋白激酶原合酶激酶信号传导介导细胞周期停滞，并通过抑制多形性胶质母细胞瘤细胞中的激活的蛋白激酶信号传导来阻断自噬通量。最后，活性化合物抑制胶质瘤的生长在体内。活性化合物通过阻止细胞周期和阻断自噬通量在体外和体内抑制胶质母细胞瘤，为多形性胶质母细胞瘤治疗提供了新的途径。
　　 多形性胶质母细胞瘤是根据世界卫生组织分类的胶质瘤，并且是成人中最广泛的原发性中枢神经系统肿瘤。在过去几十年中，即使是通过手术，放疗，化疗治疗的多形性胶质母细胞瘤患者，中位生存期不到多个月，几年相对生存率低于，死亡率接近。现有的治疗方法不能给患者带来更大的益处，需要更多新的治疗策略。近年来，中国传统医药的单体越来越多已经表现出对癌症非凡疗效。在这些天然药物单体中可能会发现一种针对多形性胶质母细胞瘤的新武器。川贝母主要分布在中国江苏省和浙江省以及日本的一些地区，数千年来一直用于治疗中医中的和肺病。病理和生物学的研究已经证实，有效成分化合物贝母是生物碱，包括，贝母素甲和贝母乙素。在最近的研究中，贝母乙素已被报道具有抗炎，镇痛，镇咳作用，并能改善急性肺损伤。此外，它还有可能对抗癌症。然而，活性化合物对多形性胶质母细胞瘤的抗肿瘤作用尚未见报道。据报道，活性化合物抑制结直肠癌细胞增殖并诱导自噬性细胞死亡。如众所周知的，蛋白激酶糖原合酶激酶途径控制参与癌症细胞生长，增殖，血管发生，代谢和运动在多形性胶质母细胞瘤许多细胞内过程。许多研究已经表明，抑制蛋白激酶通路及其下游效应，原合酶激酶，降低多形性胶质母细胞瘤细胞生长。激活的蛋白激酶，作为负调节脂质合成代谢的丝氨酸苏氨酸激酶，由代谢应激激活，以促进分解代谢过程。激活的蛋白激酶也被证明是自噬的正调节因子。大量证据证实了激活的蛋白激酶促进的正调控，一个重要的因素自噬，通过磷酸化。相反，抑制蛋白激酶信号通过增加磷酸化来增强自噬。尽管受蛋白激酶和激活的蛋白激酶信号传导途径的调节，但激活的蛋白激酶信号传导的抑制可通过抑制蛋白激酶信号传导途径导致自噬逆转。最有趣的是，研究人员确定了活性化合物对多形性胶质母细胞瘤的抗肿瘤作用的机制不同于其他报道中关于其在结肠肿瘤中的作用的机制。在本研究中，研究人员显示了活性化合物对多形性胶质母细胞瘤的有效抑制作用通过蛋白激酶原合酶激酶和激活的蛋白激酶途径发生。然而，研究人员发现与其他研究的不同之处在于，活性化合物不介导多形性胶质母细胞瘤细胞的自噬，而是阻断自噬通量。此外，活性化合物还导致阶段的细胞周期停滞。研究人员的研究结果不仅表明活性化合物可能用于治疗多形性胶质母细胞瘤，而且还表明不同肿瘤中活性化合物的作用机制不同，这可能为癌症治疗提供新的途径。
　　 自噬体的积累可能与自噬体降解的减少有关。因此，研究人员还分析了的表达程度，是一种与自噬体降解相关的自噬标记物。有与贝母乙素治疗表达显著时间和剂量依赖性增加。因此，研究人员的结果表明，活性化合物不仅引起自噬体的积累，而且还抑制了自噬体的降解。这些现象通常源于自噬通量的阻塞。的核糖核酸实验揭示出一些与营养感应激酶信号传导的变化，包括蛋白激酶和激活的蛋白激酶途径。细胞周期蛋白受蛋白激酶原合酶激酶途径调节，并且在多形性胶质母细胞瘤细胞中通过活性化合物处理下调细胞周期蛋白蛋白表达，如研究人员之前的实验所示。自噬相关因子主要受调节，其受到能量应激的蛋白激酶和激活的蛋白激酶的影响。这些表明蛋白激酶和激活的蛋白激酶信号通路可能在活性化合物抑制多形性胶质母细胞瘤中起重要作用。在细胞中进行活性化合物处理几小时后，与对照组相比，蛋白激酶磷酸化明显减少，同时，作为必需的上游和下游效应物的和原合酶激酶被去磷酸化。此外，治疗下调激活的蛋白激酶和在贝母乙素浓度相关的方式。这些结果表明蛋白激酶原合酶激酶和激活的蛋白激酶信号传导的改变是和细胞中细胞周期和自噬状态变化的原因。多形性胶质母细胞瘤，其被定义为通过世界卫生组织级神经胶质瘤，在患者总是伴随着快速的临床恶化和死亡。甚至当施加最大手术切除，放射治疗和替莫唑胺佐剂治疗的联合疗法，多形性胶质母细胞瘤患者的中位生存期仍是少于几个月。因此，需要更多的补充治疗策略。在过去的几年中，中国传统医学已证明其疗效作为一种替代药物来治疗多种癌症，包括多形性胶质母细胞瘤。一种来自贝母的生物碱已被报道具有抗肿瘤潜力的影响。此外，先前已经证明，活性化合物通过抑制神经炎症在大鼠模型中起到保护多巴胺能神经元的作用。这些发现证实，活性化合物可能穿过血脑屏障。因此，目前的研究旨在验证活性化合物是否具有多形性胶质母细胞瘤抗争特性并确定其抗癌机制，以便它可以发展成为这种破坏性癌症的新治疗选择。首先，本研究的结果表明，活性化合物在体外和体内抑制多形性胶质母细胞瘤细胞活力。随后，用贝母乙素处理细胞研究人员核糖核酸数据中识别在基因和转录物表达水平的许多癌症相关的变化。几种细胞周期基因的差异表达特别明显，同样有趣的是自噬相关的变化与结直肠癌中的活性化合物其他研究报道的变化不完全相同。
　　 然后，研究人员证明了活性化合物在期的和细胞中诱导细胞周期停滞。细胞周期停滞通常代表癌细胞对脱氧核糖核酸损伤的反应是癌症的大多数治疗方式的组成部分，这并不奇怪。此外，使用核糖核酸和蛋白质印迹分析，研究人员观察到细胞周期相关基因的明显变化，其中通常在人类癌细胞中观察到并且在许多恶性肿瘤中与细胞增殖强烈相关的细胞周期蛋白基因是最常见的基因之一。细胞周期控制调节的标志物，通过期支配过渡。细胞周期蛋白可以结合并激活，然后使磷酸化。这些都是在细胞周期在过渡的非常重要的部分。另外基因和细胞周期蛋白复合物的活化的抑制剂，已经报道了抑制脱氧核糖核酸复制和阻断癌细胞的细胞周期过渡。研究人员的研究结果表明，活性化合物通过增加和的表达以及降低，和的表达来诱导期阻滞。自噬是在肿瘤进展和治疗双刃剑：它可以促进癌症存活代谢应激下或自噬诱导肿瘤细胞死亡。近年来积累越来越多的证据表明，自体吞噬的抑制可以减少化疗和放疗的各种类型癌症的治疗性，这也是在多形性胶质母细胞瘤治疗壳体。为了阐明自噬在活性化合物治疗多形性胶质母细胞瘤中的作用，在活性化合物治疗后在透射电子显微镜下观察到和细胞中，研究人员也使用蛋白质印迹法以检测是在自体吞噬的关键蛋白质，它的功能主要是在细胞质中，其中自噬体和溶酶体存在，并且另一种广泛使用自噬标记物作为自噬体降解的标志物。与先前对活性化合物的研究不同，本研究通过结合上述实验测试了自噬，并且研究人员观察到表达的上调。研究人员的结果表明自噬在多形性胶质母细胞瘤的活性化合物治疗中的作用，表明活性化合物治疗导致自噬体积聚并阻断多形性胶质母细胞瘤细胞中的自噬通量。因此，活性化合物也可能是多形性胶质母细胞瘤的有希望的潜在辅助疗法，可用于克服化学疗法和抗辐射。为了进一步了解活性化合物在多形性胶质母细胞瘤细胞中的抗肿瘤机制，研究人员筛选了核糖核酸分析的结果，并搜索了先前实验结果与各种致癌信号级联状态之间的相关性。除了细胞周期和自噬的变化外，核糖核酸实验还揭示了许多与营养感应激酶信号传导相关的变化，包括蛋白激酶和激活的蛋白激酶途径。蛋白激酶不仅通过磷酸化和原合酶激酶失活稳定细胞周期蛋白，而且直接抑制基因和。此外，由于下游效应，原合酶激酶也调节细胞周期蛋白，而原合酶激酶抑制增加的的水平和下调和对，其可以阻断细胞周期行进。在这项研究中，研究人员表明，贝母素乙显著抑制蛋白激酶和原合酶激酶的磷酸化在多形性胶质母细胞瘤细胞系中。通过用过表达蛋白激酶的慢病毒转染蛋白激酶细胞，和细胞，证实了活性化合物介导的多形性胶质母细胞瘤细胞的细胞周期停滞。蛋白激酶的过度表达导致细胞周期停滞的逆转，这可通过细胞周期蛋白和原合酶激酶水平的增加来证明。此外一种含有吗啉的化合物是蛋白激酶途径的有效抑制剂产生与活性化合物相似的效果，进一步证实活性化合物抑制蛋白激酶原合酶激酶诱导多形性胶质母细胞瘤细胞中的细胞周期停滞。研究人员的数据表明，活性化合物诱导和细胞的细胞周期停滞是由于抑制蛋白激酶原合酶激酶信号通路。
　　 越来越多的证据表明，自噬受体蛋白主要通过介导，以响应高能应激。此外，已知的是蛋白激酶自噬过程，其也由激活的蛋白激酶调节期间调节。蛋白激酶信号通过促进磷酸化来增强自噬。然而，激活的蛋白激酶也已显示磷酸化和自噬期间激活。尽管有证据表明蛋白激酶和激活的蛋白激酶与自噬相关，但自噬是一个动态过程，并且可能存在许多其他潜在的调节机制。例如，一些研究人员推论，还参与反馈机制，其可以允许额外的控制。然而，蛋白激酶激活的蛋白激酶与其与自噬的关系之间的相互作用仍然不明确，它们之间的关系网络需要进一步研究。在这项研究中,研究人员证明活性化合物显着抑制多形性胶质母细胞瘤细胞系中蛋白激酶,激活的蛋白激酶和的磷酸化。然而，在自噬中，这两种途径的抑制通常会产生非常不同的结果。抑制激活的蛋白激酶信号可以通过抑制蛋白激酶信号通路来导致自噬逆转。类似地，研究人员的结果意味着当在多形性胶质母细胞瘤细胞中在活性化合物条件下竞争作为底物时，对激活的蛋白激酶途径的影响更大。此外，在蛋白激酶过表达细胞和蛋白激酶抑制细胞中，活性化合物通过抑制激活的蛋白激酶信号传导来拮抗介导的自噬。依赖性介导的激活的蛋白激酶依赖性自噬通量阻断也被，一种激活的蛋白激酶激活剂证实。在激活的激活的蛋白激酶组，自噬逆转，由的表达减少。
　　 总之，研究人员首次在体外和体内证明了活性化合物在多形性胶质母细胞瘤细胞中的抗癌特性。此外，作为与结肠癌中活性化合物不同的机制，研究人员清楚地证明了活性化合物通过诱导期细胞周期停滞和自噬通量阻断来抑制多形性胶质母细胞瘤细胞生长，这似乎是通过蛋白激酶原合酶激酶调节的。和激活的蛋白激酶信号通路。此外，活性化合物也可能在多形性胶质母细胞瘤细胞中具有优异的辅助化疗效果。研究人员做了一些初步实验，显示帽子可以增强替莫唑胺的抗多形性胶质母细胞瘤效果。因此，活性化合物可以提供新的抗多形性胶质母细胞瘤治疗，值得在体内进一步研究实验和临床试验。研究人员的工作表明，活性化合物通过抑制蛋白激酶原合酶激酶信号传导和通过抑制激活的蛋白激酶信号传导阻断自噬通量阻断，通过细胞周期停滞在体外和体内抑制胶质母细胞瘤。